Cygnus講座邀請 | 宿主細(xì)胞蛋白(HCP)分析進(jìn)展與質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)控制策...
講座時(shí)間:北京時(shí)間2025年9月4號(hào)(周四)23:00 報(bào)名方式:https://globalmeet.webcasts.com/starthere.jsp?ei=1730233&tp_key=11ee2072ce...2025-09-04更多>
熱烈慶祝西美杰榮獲科興“聚勢?卓越貢獻(xiàn)獎(jiǎng)”
2025年8月28日,由北京科興控股(集團(tuán))有限公司(以下簡稱“科興集團(tuán)”)主辦的2025供應(yīng)鏈生態(tài)大會(huì)在位于北京昌平的科興來福城舉辦,這也是...2025-09-04更多>
熱烈慶祝西美杰榮獲LGC亞太區(qū)優(yōu)秀合作伙伴獎(jiǎng)項(xiàng)
在2025年的亞太地區(qū)渠道合作伙伴會(huì)議上,北京西美杰科技科學(xué)有限公司(以下簡稱“西美杰”)榮獲了兩項(xiàng)由LGC頒發(fā)的重量級獎(jiǎng)項(xiàng),分別是亞太區(qū)...2025-08-28更多>
Agrisera講座Part II:Western Blot流程的優(yōu)化
Western Blot實(shí)驗(yàn)效率與結(jié)果的可靠性,很大程度上取決于對抗體特性的理解、正確的選擇以及實(shí)驗(yàn)流程的優(yōu)化。為解決WB實(shí)驗(yàn)過程中的常見問題,Ag...2025-06-25更多>
Cygnus AccuRes? HCD檢測試劑盒特價(jià)促銷
在生物制品的生產(chǎn)過程中,宿主細(xì)胞DNA可能會(huì)殘留其中,這將會(huì)導(dǎo)致致癌基因或其他風(fēng)險(xiǎn)的遺傳物質(zhì)進(jìn)入到最終的藥物制劑中。為了降低這種風(fēng)險(xiǎn),...2025-03-20更多>
PhytoTech植物組培產(chǎn)品促銷活動(dòng)
限時(shí)瘋搶!PhytoTech 植物組培產(chǎn)品促銷盛宴來襲,全場低至2折起,涵蓋各類凝膠、激素、抗生素等。實(shí)惠的價(jià)格,優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,西美杰常備現(xiàn)貨,...2025-02-12更多>
Applichem 核酸污染清除試劑(A7089)特價(jià)促銷
2024-12-12更多>
Applichem 分子生物學(xué)級去離子甲酰(A2156) 特價(jià)促銷
2024-12-12更多>
基于新型納米纖維的LentiHERO在LVV和HSV純化工藝中的應(yīng)用
溶瘤病毒如單純皰疹病毒(HSV)和痘苗病毒因能在腫瘤細(xì)胞中選擇性復(fù)制,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞溶解和觸發(fā)免疫應(yīng)答的能力,而在癌癥治療領(lǐng)域中逐漸受到重視。同樣,慢病毒載體(LVV),如伽利略病毒(GalV)和VSV-G能夠通過實(shí)現(xiàn)細(xì)胞類型特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)來增強(qiáng)基因治療效果。這些病毒對下游的純化策略產(chǎn)生了顛覆性影響。 常用于基因治療的病毒載體尺寸示意圖:腺相關(guān)病毒AAV、慢病毒LVV、單純皰疹病毒HSV和痘苗病毒VACV 對于這些尺寸較大的病毒載體,傳統(tǒng)的基于瓊脂糖的層析方法在工藝放大、產(chǎn)量提升以及雜質(zhì)(如HCP等)去除等方面存在局限性。為了解決這些瓶頸問題,Astrea Bioseparations研發(fā)推出的新一代基于納米纖維的層析介質(zhì)LentiHERO為病毒純化提供了新的思路。相比于傳統(tǒng)的瓊脂糖基質(zhì),LentiHERO不論從結(jié)合載量、雜質(zhì)去除還是工藝放大等方面都具有顯著優(yōu)勢。以下研究將從病毒的結(jié)合能力、回收率、HCP和dsDNA的去除能力、工藝放大等方面充分評估LentiHERO對不同包膜(VSV-G、4070A、GalV)的LVV假病毒和溶瘤病毒HSV的純化性能。1. LVV生產(chǎn)和純化工藝流程 LentiHERO對VSV-G LVV有更高的結(jié)合力與動(dòng)態(tài)結(jié)合載量 下圖是VSV-G LVV樣品在不同流速下通過LentiHERO(LH)與Q膜流穿液的TU和p24檢測結(jié)果,LentiHERO對LVV的結(jié)合能力顯著高于Q膜。由此表明,LeniHERO在LVV流穿之前能夠處理更大體積的料液。 LentiHERO有更高的動(dòng)態(tài)結(jié)合載量 提升LVV回收率與純度的優(yōu)化方案 如下圖所示,條件優(yōu)化后LVV回收率提升至82%,收獲的病毒滴度>2E+9 TU/mL,且HCD/HCP去除率>90%。 LentiHERO®可大幅減少純化的緩沖液體積生產(chǎn)規(guī)模所需的緩沖液體積預(yù)估 精氨酸洗脫可以省去洗脫后的稀釋步驟,簡化工藝流程; 低鹽或精氨酸洗脫可顯著減少緩沖液用量并降低處理體積。 使用LentiHERO® 1純化非VSV-G包膜的LVV假病毒 重組慢病毒可以通過不同的包膜蛋白來提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和改變特異性,從而直接影響下游純化策略。 不同類型慢病毒在細(xì)胞和基因治療中的應(yīng)用 LentiHERO® 1對LVV的回收率(TU) LentiHERO®成功實(shí)現(xiàn)了非VSV-G慢病毒(4047A:100%,GalV:36%)的高效純化。 LentiHERO®具備強(qiáng)大的雜質(zhì)去除能力,在不影響載體功能的情況下可去除>98%的HCP及>87%的dsDNA殘留 2. HSV-1溶瘤病毒生產(chǎn)和純化工藝流程 LentiHERO®純化野生型HSV-1(KOS)的結(jié)果 篩選裝置上樣量15ml,測得填料載量為1.5E+10 IU/ml。 感染性HSV回收率為56%,LentiHERO®載量可達(dá)9.2E+9 IU/ml,大部分感染性HSV在0.6M NaCl條件下被洗脫。 LentiHERO®純化pBACYAC-HSV-1(KOS)的結(jié)果 篩選裝置上樣量20ml,測得填料載量為3E+8 IU/ml。 用0.8M精氨酸洗脫,HSV回收率可達(dá)到69%,LentiHERO®載量可達(dá)1.4E+8 IU/ml,同時(shí)實(shí)現(xiàn)高效的雜質(zhì)去除。 結(jié)論 ? LentiHERO®弱陰離子納米纖維層析技術(shù)可廣泛應(yīng)用于多種病毒載體的純化,包括不同包膜的慢病毒(4070A,VSV-G,GalV),溶瘤病毒HSV-1; ? LentiHERO®純化病毒具有高回收率:4070A: 100%,VSV-G: 82%,GalV: 36%,HSV-1: 69% ? LentiHERO®具有高效的宿主蛋白去除效率:HCP去除率>97% ? LentiHERO®可放大形成平臺(tái)工藝,適用于工業(yè)化生產(chǎn) ? LentiHERO®具備拓展應(yīng)用于其他病毒載體的潛力,如腺病毒,痘苗病毒及病毒樣顆粒(VLPs)等 ? LentiHERO®支持基因治療及溶瘤病毒生產(chǎn)工藝的優(yōu)化 產(chǎn)品信息 貨號(hào) 品名 規(guī)格 NL100100 Nereus LentiHERO 2 unit pack(離心管形式) LH0001001A LentiHERO® 1 1 mL(層析柱形式) LH0010001B LentiHERO® 10 10 mL(層析柱形式) LH0010001C LentiHERO® 100 100 mL(層析柱形式) 如您對上述產(chǎn)品感興趣,歡迎點(diǎn)擊這里填寫信息,Astrea Bioseparations技術(shù)專家將為您提供個(gè)性化優(yōu)化方案,切實(shí)幫您解決純化工藝中的疑難問題。 Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué),擁有超過30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),是世界級層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過21個(gè)生產(chǎn)工藝通過了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地,專注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù),解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時(shí)問題,實(shí)現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過程,完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。 西美杰是Astrea Bioseparations中國區(qū)代理,為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎隨時(shí)撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.kamjd.com了解更多信息。 更多>Pfanstiehl 喜獲第18個(gè)CDE登記號(hào)-甘氨酸Glycine G-140
“熱烈祝賀Pfanstiehl的注射級甘氨酸Glycine(G-140)喜獲CDE登記號(hào)F20250000403, 這是Pfanstiehl產(chǎn)品獲得的第18個(gè)CDE登記號(hào)!”甘氨酸在醫(yī)藥輔料制劑中應(yīng)用廣泛,, 可作為緩沖劑,增溶劑,穩(wěn)定劑等,具有諸多優(yōu)勢。Pfanstiehl秉承一貫高品質(zhì)理念,為滿足全球生物制藥行業(yè)對于高品質(zhì)甘氨酸的需求,隆重推出的注射級甘氨酸Glycine (G-140), 具有超高純度,超低內(nèi)毒素,超低金屬殘留的特點(diǎn),單獨(dú)檢測29種金屬離子,并且新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶和脂肪酶,亞硝酸鹽等多項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)的檢測,符合多國藥典規(guī)定(USP, EP, BP, JPE, ChP),可用于生物治療性藥物和疫苗的生產(chǎn)。產(chǎn)品信息:· 產(chǎn)品名稱:Glycine, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals, USP, EP, BP, JPE, ChP (G-140)· 中文名稱:甘氨酸· 分子式:C2H5NO2· 分子量:75.07 g / mol· CAS號(hào):56-40-6· 產(chǎn)品貨號(hào):G-140產(chǎn)品特點(diǎn): · 超高純度,超低內(nèi)毒素,超低微生物含量,超低金屬雜質(zhì)殘留· 質(zhì)量指標(biāo)新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶,脂肪酶和亞硝酸鹽檢測· 符合多國藥典:USP, EP, BP, JPE, ChP· 符合ICH Q3D標(biāo)準(zhǔn)· 符合GMP標(biāo)準(zhǔn)· 已獲DMF和CDE登記號(hào) 產(chǎn)品應(yīng)用:· 緩沖劑· 穩(wěn)定劑· 增溶劑如果您對Pfanstiehl注射級別Glycine G-140感興趣,歡迎聯(lián)系Pfanstiehl 中國區(qū)代理商北京西美杰科技有限公司獲得如下詳細(xì)的產(chǎn)品概況說明文件和測試樣品。Pfanstiehl Inc.最新產(chǎn)品系列如下,歡迎聯(lián)系北京西美杰科技有限公司獲取100g裝免費(fèi)樣品。北京西美杰科技有限公司為Pfanstiehl中國代理,為客戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www.kamjd.com了解更多信息。 更多>新品上市 | Alzet給藥泵100ul緩釋6周(Model 1006)
ALZET新推出了Model 1006給藥泵,作為滲透壓給藥泵系列產(chǎn)品線的最新成員,該新型號(hào)可實(shí)現(xiàn)長達(dá)6周的持續(xù)給藥,是目前在100μl規(guī)格Alzet泵中緩釋時(shí)間最長的泵。Model 1006 在小劑量、長周期的動(dòng)物給藥應(yīng)用中樹立了新的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。該產(chǎn)品專為臨床前研究設(shè)計(jì),能夠精確且穩(wěn)定地輸注包括藥物、激素及其他化合物在內(nèi)的多種制劑,是適用于需長期維持恒定輸注速率的慢性研究項(xiàng)目的理想解決方案。 1006 Alzet泵優(yōu)勢特點(diǎn): 6周緩釋給藥——是目前100μl規(guī)格中緩釋時(shí)間最長的泵尺寸精巧——適用于小鼠和其他小型動(dòng)物精確輸注——確??煽壳曳€(wěn)定的緩釋速率Alzet 1006泵參數(shù): 給藥體積:100μl 緩釋速率:0.08μl/h 持續(xù)給藥時(shí)間:6周 預(yù)啟動(dòng)時(shí)間:72h 點(diǎn)擊這里獲取1006 Alzet泵詳細(xì)使用指南。 Alzet滲透壓給藥泵產(chǎn)品列表 型號(hào) 品名 規(guī)格 1003D 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋3天 10個(gè)/盒 1007D 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋7天 10個(gè)/盒 1002 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋2周 10個(gè)/盒 1004 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋4周 10個(gè)/盒 1006 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋6周 NEW 10個(gè)/盒 2001D 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋1天 10個(gè)/盒 2001 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋1周 10個(gè)/盒 2002 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋2周 10個(gè)/盒 2004 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋4周 10個(gè)/盒 2006 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋6周 10個(gè)/盒 2ML1 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋1周 10個(gè)/盒 2ML2 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋2周 10個(gè)/盒 2ML4 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋4周 10個(gè)/盒 北京西美杰科技有限公司是Alzet中國一級代理,可為您提供全方位的售前售后技術(shù)支持,如果您需要更多Alzet緩釋給藥泵資料,歡迎撥打西美杰全國客服熱線400-050-4006或登錄西美杰官方網(wǎng)站www.kamjd.com查詢訂購。 更多>HCP ELISA實(shí)驗(yàn)布板優(yōu)化指南:提升數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的關(guān)鍵
截至目前,ELISA方法仍是工藝監(jiān)測和產(chǎn)品批次放行中檢測并定量HCP的金標(biāo)準(zhǔn)。Cygnus提供HCP 檢測試劑盒已經(jīng)超過25年,開發(fā)了許多專利方法生產(chǎn)對HCP具有廣泛反應(yīng)性的抗體,目前提供超過32種不同的表達(dá)平臺(tái)的HCP ELISA檢測試劑盒。 Cygnus的ELISA試劑盒使用預(yù)包被板,檢測同時(shí)加入抗原與檢測抗體進(jìn)行孵育。HCP檢測實(shí)際上相當(dāng)復(fù)雜,主要依賴于能夠?qū)?shù)千種HCP產(chǎn)生反應(yīng)的HCP抗體,要使 ELISA檢測的結(jié)果準(zhǔn)確,針對抗原的捕獲和檢測抗體必須都要過量。只有在抗體過量的條件下,才能得到正斜率的劑量曲線,從而實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的定量。因此,合理的孔板布局設(shè)置是一個(gè)很好的開始。Cygnus HCP ELISA檢測基本流程 一、HCP ELISA布板規(guī)范 1. 復(fù)孔要求 推薦采用三復(fù)孔設(shè)計(jì),三個(gè)復(fù)孔是最有效的做法,可以發(fā)現(xiàn)并去除可能出現(xiàn)的異常值,在完成實(shí)驗(yàn)后做問題排查時(shí)能提供更多信息。需要注意的是,如果檢測樣品數(shù)量不支持設(shè)置三復(fù)孔,那么最少要設(shè)置雙復(fù)孔,沒有復(fù)孔的檢測是無效的。如果可以的話,最好對標(biāo)準(zhǔn)品和對照品設(shè)置三復(fù)孔。 2. 空白對照 不建議設(shè)置額外的空白對照,扣除空白對照不會(huì)改善實(shí)驗(yàn)結(jié)果,甚至還會(huì)導(dǎo)致CV值升高。詳情請參考《使用Cygnus ELISA試劑盒該如何設(shè)置空白對照?》。 3. 設(shè)置陽性對照。 使用處于標(biāo)準(zhǔn)曲線中間濃度范圍的標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照(低濃度標(biāo)準(zhǔn)品受靈敏度影響較大)。當(dāng)使用來自HCP標(biāo)準(zhǔn)品的陽性對照時(shí),曲線中間的濃度點(diǎn)通常會(huì)提供最多的信息。 4. 設(shè)置陰性對照 使用樣品稀釋液作為空白對照,從而評估0濃度標(biāo)準(zhǔn)品與所使用的稀釋液之間是否存在顯著偏差。 5. 設(shè)置1-2個(gè)額外的HCP對照 可以使用工藝流程中的一個(gè)已經(jīng)過充分表征的在制品樣品作為額外的HCP對照。有富余孔的條件下,設(shè)置兩個(gè)稀釋度會(huì)比只有一個(gè)稀釋度效果更好。 6. 使用低結(jié)合板優(yōu)化加樣步驟 在向孔板加樣時(shí),最重要的是要思考完成每一步驟需要多長時(shí)間,每一步驟的移動(dòng)方向是什么。對于這種情況,預(yù)先將待檢樣品和酶標(biāo)二抗加入低結(jié)合板內(nèi),然后再整個(gè)轉(zhuǎn)移到檢測孔板中,這樣能夠大幅減少將樣品添加到檢測板時(shí)造成的加樣誤差。 二、ELISA布板示例 樣品布板的最佳方式是將標(biāo)準(zhǔn)品置于板的左側(cè),將對照品(陰性或陽性對照)置于板的右側(cè),同時(shí)還要考慮需要設(shè)置的復(fù)孔數(shù)量,樣品稀釋梯度,以及在加樣和洗板時(shí)的移動(dòng)方向。將標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品分別置于板的兩側(cè),確??梢詮目装宓娜我庖粋?cè)都能獲取相同的信息。這樣能夠清晰地反映出在加樣時(shí)或洗板過程中可能出現(xiàn)的任何操作失誤,而且通過改變這些孔在板內(nèi)的位置能夠更好地進(jìn)行問題排查。 三復(fù)孔布板推薦示意圖 5個(gè)樣品4個(gè)稀釋梯度,所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣品及對照品都設(shè)置三個(gè)復(fù)孔 雙復(fù)孔布板推薦示意圖 4個(gè)樣品和加標(biāo)控制品都設(shè)置4稀釋梯度,所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣品及對照品都設(shè)置雙復(fù)孔 未知濃度HCP樣品布板推薦示意圖 4個(gè)樣品8個(gè)稀釋梯度,以便收集未知HCP水平樣品的大部分信息。 更多布板示例文末獲取。 三、HCP ELISA布板常見問題排查及解決辦法 1. 加樣問題 在HCP ELISA檢測過程中,每2分鐘的靜態(tài)孵育相當(dāng)于1分鐘的震蕩孵育。也就是說,如果加樣耗費(fèi)了20分鐘,就相當(dāng)于最先加入的樣品比最后加入的樣品多孵育了10分鐘。假如震蕩孵育的時(shí)間為1個(gè)小時(shí),而加樣就花費(fèi)了20分鐘,那么勢必會(huì)導(dǎo)致前后加入的樣品結(jié)合效率有差異,結(jié)果表現(xiàn)為最先加入的樣品會(huì)得到偏高的OD值。因此,加樣的原則是要確保板內(nèi)所有孔的孵育時(shí)間盡可能一致。如果一次需要檢測的樣品數(shù)量較多,為了避免在加樣過程耗費(fèi)太多時(shí)間,我們建議先將樣品和酶標(biāo)抗體加入低結(jié)合板中,然后再用排槍快速轉(zhuǎn)移到檢測板內(nèi)。實(shí)踐證明,這種操作方法可以有效改善因加樣時(shí)間差而導(dǎo)致的結(jié)果異常問題。 2. 洗板問題 不合理的洗板操作也會(huì)導(dǎo)致檢測結(jié)果的異常,與加樣操作類似,HCP ELISA洗板需要遵循的核心原則就是交替方向洗板,也就是盡可能確保所有孔的總清洗時(shí)間一致。關(guān)于洗板操作的注意事項(xiàng)請參考《如何用正確的洗板方法解決ELISA檢測結(jié)果漂移的問題?》 四 常見錯(cuò)誤案例與改進(jìn)辦法 案例一 加樣緩慢造成的誤差 如果同一個(gè)樣品依次從A到H行,按照1到12列方向逐孔緩慢加樣,即使采用了正確的洗板方式,這種加樣方式也會(huì)對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。以下熱圖示例展示了如果將相同的樣品以緩慢的速度加入孔板會(huì)發(fā)生的情況。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 1.000 0.976 0.952 0.928 0.904 0.880 0.856 0.832 0.808 0.784 0.760 0.736 B 0.997 0.973 0.949 0.925 0.901 0.877 0.853 0.829 0.805 0.781 0.757 0.733 C 0.994 0.970 0.946 0.922 0.898 0.874 0.850 0.826 0.802 0.778 0.754 0.730 D 0.991 0.967 0.943 0.919 0.895 0.871 0.847 0.823 0.799 0.775 0.751 0.727 E 0.988 0.964 0.940 0.916 0.892 0.868 0.844 0.820 0.796 0.772 0.748 0.724 F 0.985 0.961 0.937 0.913 0.889 0.865 0.841 0.817 0.793 0.769 0.745 0.721 G 0.982 0.958 0.934 0.910 0.886 0.862 0.838 0.814 0.790 0.766 0.742 0.718 H 0.979 0.955 0.931 0.907 0.883 0.859 0.835 0.811 0.787 0.763 0.739 0.715 改進(jìn)辦法:預(yù)先在低結(jié)合板中加入酶標(biāo)抗體和樣品,之后再用排槍將所有樣品快速轉(zhuǎn)移到檢測板中進(jìn)行孵育。這樣可以有效減少不同孔加樣的時(shí)間差,確保所有孔的孵育時(shí)間盡可能一致,進(jìn)而降低異常值出現(xiàn)的概率。 案例二 同一個(gè)方向洗板造成的誤差 如果4次洗板都是同一個(gè)方向加入洗液的話,也會(huì)對檢測結(jié)果造成影響。以下熱圖示例展示了4次洗板都是用排槍按照1到12列加入洗液可能發(fā)生的情況。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 B 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 C 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 D 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 E 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 F 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 G 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 H 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 改進(jìn)辦法:建議采用交替方向的方式洗板,也就是第1和3次洗板與第2和4次洗板要從相反的方向加入洗液。 五 HCP ELISA結(jié)果異常案例與問題排查 如下圖所示,該檢測結(jié)果樣品復(fù)孔之間出現(xiàn)自左向右的降低的趨勢,且孔板右側(cè)的陰性對照和陽性對照的OD值都比左側(cè)低。通過兩側(cè)陽性對照結(jié)果不一致可以判定此次實(shí)驗(yàn)是失敗的。此外,左側(cè)陰性對照復(fù)孔之間OD值的平均差異為0.01,而右側(cè)陰性對照的OD值則接近背景水平,因此還需更多信息來進(jìn)一步判斷問題來自加樣還是洗板。 綜上所述,本次實(shí)驗(yàn)失敗的原因可能為:1、加樣太慢;2、洗板沒有交替方向的操作。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A STD 1 Sample 1 Dilution 1 Sample 3 Dilution 1 Sample 5 Dilution 1 B STD 2 Sample 1 Dilution 2 Sample 3 Dilution 2 Sample 5 Dilution 2 C STD 3 Sample 1 Dilution 3 Sample 3 Dilution 3 Sample 5 Dilution 3 D STD 4 Sample 1 Dilution 4 Sample 3 Dilution 4 Sample 5 Dilution 4 E STD 5 Sample 2 Dilution 1 Sample 4 Dilution 1 Negative Control (Diluent) F STD 6 Sample 2 Dilution 2 Sample 4 Dilution 2 Control Dilution 1(External HCP) G STD 7 Sample 2 Dilution 3 Sample 4 Dilution 3 Control Dilution 2 (External HCP) H STD 8 Sample 2 Dilution 4 Sample 4 Dilution 4 Postive Control (STD 5 repeat) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 2.500 2.450 2.400 1.200 1.150 1.100 2.000 1.950 1.900 1.700 1.650 1.600 B 1.200 1.150 1.100 0.600 0.550 0.500 1.000 0.950 0.900 0.850 0.800 0.750 C 0.600 0.550 0.500 0.300 0.280 0.260 0.500 0.480 0.460 0.425 0.405 0.385 D 0.300 0.250 0.200 0.150 0.140 0.130 0.250 0.240 0.230 0.212 0.202 0.192 E 0.150 0.130 0.110 1.400 1.350 1.300 0.125 0.115 0.105 0.005 0.005 0.005 F 0.075 0.065 0.055 0.700 0.650 0.600 0.550 0.500 0.450 0.230 0.225 0.220 G 0.038 0.033 0.028 0.350 0.330 0.310 0.290 0.270 0.250 0.115 0.095 0.075 H 0.015 0.010 0.005 0.175 0.165 0.155 0.145 0.135 0.125 0.090 0.080 0.070 總結(jié) ? 在ELISA實(shí)驗(yàn)之前應(yīng)該合理規(guī)劃孔板布局:優(yōu)化的孔板布局能夠監(jiān)測關(guān)鍵性能指標(biāo),并在出現(xiàn)問題時(shí)更快地進(jìn)行問題排查。更多布板示例請點(diǎn)擊這里獲取。 ? HCP ELISA的關(guān)鍵考慮因素包括:復(fù)孔設(shè)置、樣品稀釋梯度、加樣和洗板的操作、對照的設(shè)置。 ? 用低結(jié)合板來優(yōu)化加樣操作,可以最大程度減少OD值的偏差。 ? 切勿使用空白對照,這樣做會(huì)提高檢測結(jié)果的變異系數(shù)。 相關(guān)產(chǎn)品推薦: 品名:Sample Treatment Plate (樣品處理板) 貨號(hào):F402 規(guī)格:1 plate Cygnus Technologies, LLC.為生物技術(shù)和生物制藥行業(yè)提供產(chǎn)品和分析方法,旨在加速研發(fā)階段和提高產(chǎn)品質(zhì)量。Cygnus開發(fā)和生產(chǎn)的生物工藝殘留試劑盒,用于檢測超過50種不同表達(dá)系統(tǒng)的特異性雜質(zhì)。Cygnus作為專注于生物技術(shù)應(yīng)用免疫檢測的高靈敏度分析技術(shù)的專家,Cygnus的產(chǎn)品和服務(wù)已經(jīng)被幾乎所有主要的生物制藥公司使用超過25年。 北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國總代理,與國內(nèi)眾多知名藥企,CRO/CMO企業(yè)建立了長久穩(wěn)定的合作關(guān)系。多年來西美杰的產(chǎn)品及服務(wù)幫助許多企業(yè)加速R&D階段,提高藥物質(zhì)量、純度和安全,加速優(yōu)化研發(fā)工藝,減少產(chǎn)品上市時(shí)間,降低QC成本。如您對上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電西美杰客服熱線400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www.kamjd.com了解更多信息。 更多>AppliChem低內(nèi)毒素原料:為降低生物工藝風(fēng)險(xiǎn)保駕護(hù)航
西美杰代理PanReac AppliChem 作為擁有百年歷史的歐洲生物化學(xué)試劑與制藥原料生產(chǎn)商,專注提供低內(nèi)毒素原料,可有效降低生物工藝風(fēng)險(xiǎn)。其產(chǎn)品符合 USP、EP、JP、ChP 等多國藥典標(biāo)準(zhǔn),具備超低內(nèi)毒素水平、嚴(yán)格質(zhì)量控制及批次一致性,為科研人員、制藥企業(yè)及培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)提供可靠支持,助力保障藥品安全性與工藝穩(wěn)定性。 更多>